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　　試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）。往預先包被人糖原合成酶激酶3β（GSK3β）捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體，經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人糖原合成酶激酶3β（GSK3β）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計算樣品濃度。

 

　　糖原合成酶激酶（GSK3β）抗體的性能特點：

　　1、檢測范圍：0.25ng/mL–8ng/mL。

　　2、靈敏度：低檢測濃度小于0.1ng/mL。

　　3、特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

　　4、重復性：板內變異系數(shù)小于10%，板間變異系數(shù)小于15%。

 

　　樣本處理及要求：

　　1、血清：全血標本請于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

　　2、血漿：可用EDTA或肝素作為抗凝劑，標本采集后30分鐘內于2-8°C1000g離心20分鐘，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。

　　3、組織勻漿：用預冷的PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應9mL的PBS，具體體積可根據實驗需要適當調整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞，可以對勻漿液進行超聲破碎，或反復凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。

　　4、細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本：1000g離心20分鐘，取上清即可檢測，或將標本放于-20℃或-80℃保存，但應避免反復凍融。