国产精品视频500部丨天堂视频中文在线丨狠狠色伊人亚洲综合网站l丨136fldh导航福利视频丨亚洲综合激情丨yes4444视频在线观看丨人人草网站丨精品国产露脸对白在线观看丨成人国产欧美大片一区丨亚洲国产剧情中文视频在线丨亚洲色图欧美视频丨精品久久网丨成人福利网丨久久精品这里丨大奶毛片丨暖暖日本在线观看丨国产美女a做受大片观看丨国产精品色拉拉丨日韩中文字幕在线专区丨九九av在线丨久久午夜精品视频丨肉丝美脚视频一区二区丨草草视频网站丨久久精品视频在线看丨欧美性欧美zzzzzzzzz

血清的熱滅活是很多培養(yǎng)者感興趣的話題，價(jià)格不菲的血清中含有諸如生長(zhǎng)因子，維生素，氨基酸等珍貴物質(zhì)，而將它們置于50℃以上的溫度長(zhǎng)達(dá)30分鐘是*沒(méi)有必要的。盡管如此，在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室之中血清的熱滅活還是作為常規(guī)來(lái)執(zhí)行，多數(shù)實(shí)驗(yàn)者并沒(méi)有考慮熱處理對(duì)血清中的生長(zhǎng)因子，氨基酸等成分帶來(lái)的負(fù)面影響，在我們的技術(shù)熱線中常被提到的就是否該對(duì)血清進(jìn)行熱滅活，下面我們就對(duì)胎牛血清的熱滅活進(jìn)行一些探討和解釋。

熱滅活目的是為了去除血清中補(bǔ)體等對(duì)熱敏感的物質(zhì)，但是在胎牛血清中對(duì)補(bǔ)體的滅活則明顯沒(méi)有必要。Triglia和Linscott曾對(duì)商業(yè)胎牛血清中的補(bǔ)體成分進(jìn)行測(cè)定，他們發(fā)現(xiàn)胎牛血清中含有的C1，C6僅達(dá)成年動(dòng)物血清的1-3%，而其它補(bǔ)體成分僅有成年動(dòng)物的5-50％，至于補(bǔ)體的主要成分C3在胎牛血清中則幾乎不能檢出。通過(guò)補(bǔ)體固定實(shí)驗(yàn)，我們也在多個(gè)不同批次的胎牛血清中獲得了相似的結(jié)果。即使是在未稀釋的血清中，也未發(fā)現(xiàn)有明顯的溶血現(xiàn)象。另外，多數(shù)實(shí)驗(yàn)室在培養(yǎng)前將培養(yǎng)液進(jìn)行預(yù)熱的過(guò)程，也對(duì)熱敏的補(bǔ)體有滅活的作用。

根據(jù)調(diào)查，至少70％的研究者對(duì)血清的滅活僅僅是因?yàn)樽裾粘Ｒ?guī)操作，或者說(shuō)認(rèn)為是理所當(dāng)然的。常規(guī)滅活建議的溫度在45℃到62℃之間,而時(shí)間則從15分鐘到60分鐘不等.其中常用的手法是56℃熱處理30分鐘。隨著血清采集、處理、加工工藝的提高，許多早先認(rèn)為是熱滅活的原因已經(jīng)不再成立，只有少數(shù)對(duì)血清進(jìn)行熱滅活的研究者在實(shí)驗(yàn)中證實(shí)了這一步驟的有效性和必要性。

Pinyopummintr等證明血清去除滅活步驟不影響牛胚胎的發(fā)育分化；有研究結(jié)果證實(shí)熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對(duì)細(xì)胞的促粘附作用，在用SV-BHK、BALB-3T3、CV－1、FS-4細(xì)胞對(duì)細(xì)胞粘附實(shí)驗(yàn)中，熱滅活對(duì)胎牛血清的影響小于對(duì)小牛血清的影響。

我們調(diào)查了熱滅活對(duì)胎牛血清以及對(duì)其中不同細(xì)胞株生長(zhǎng)能力的影響。通過(guò)比較11個(gè)不同細(xì)胞株，發(fā)現(xiàn)其中熱滅活對(duì)6 個(gè)細(xì)胞株（HBAE，MDBK，Vero，成纖維細(xì)胞，MRC-5）的生長(zhǎng)帶來(lái)負(fù)面影響，三個(gè)細(xì)胞株（FOX-NY，MDCK和CHO-K1）不受熱滅活的影響，而只有兩個(gè)細(xì)胞株（Balb/3T3，Sp2/0Ag14 hybrid），在熱滅活之后，細(xì)胞生長(zhǎng)有輕微的改善。所以，在正常的操作下，熱滅活通常對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)沒(méi)有明顯的促進(jìn)作用。

在對(duì)補(bǔ)體滅活以外，熱處理同時(shí)也對(duì)血清中可能存在的支原體具有滅活作用。多年以前，450納米孔徑的濾膜被用于加工血清時(shí)，血清中支原體的污染時(shí)有發(fā)生。針對(duì)這個(gè)問(wèn)題，HyClone使用100納米三層濾膜連續(xù)濾過(guò)技術(shù)，自從采用這項(xiàng)技術(shù)以及后來(lái)的40納米濾過(guò)技術(shù)之后，我們的血清產(chǎn)品中沒(méi)有再發(fā)現(xiàn)有支原體的污染，也是使得熱滅活成為不必要的另外一個(gè)原因。

在正常操作下，熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來(lái)負(fù)面的影響，對(duì)血清的加熱經(jīng)常導(dǎo)致血清中沉淀的產(chǎn)生，而導(dǎo)致的沉淀又常常被認(rèn)為是微生物的污染。注意到這個(gè)現(xiàn)象之后，為了驗(yàn)證污染的存在，或者促進(jìn)沉淀的溶解，許多培養(yǎng)者往往將血清放置37℃溫育。這卻往往使情況變得更糟，血清中的蛋白進(jìn)一步的析出，為了確信血清未被污染，進(jìn)行的鏡檢，無(wú)菌培養(yǎng)試驗(yàn)，和革蘭氏染色試驗(yàn)更是浪費(fèi)了實(shí)驗(yàn)者大量的時(shí)間和精力。

總之，多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場(chǎng)合下，熱滅活并不會(huì)改善細(xì)胞的生長(zhǎng)，卻降低了支持細(xì)胞生長(zhǎng)的能力。即使在少數(shù)有促進(jìn)的情況下，其促進(jìn)的比率也是微不足道的。另外，血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認(rèn)為是微生物的污染，從而給用戶和供應(yīng)商都帶來(lái)不必要的麻煩。我們建議，對(duì)于那些對(duì)血清進(jìn)行滅活的用戶，需要通過(guò)試驗(yàn)來(lái)證實(shí)其必要性，確定滅活的適當(dāng)條件；在滅活過(guò)程中，需要嚴(yán)格認(rèn)真監(jiān)測(cè)，并選擇一個(gè)可重復(fù)的方案進(jìn)行操作。