国产精品视频500部丨天堂视频中文在线丨狠狠色伊人亚洲综合网站l丨136fldh导航福利视频丨亚洲综合激情丨yes4444视频在线观看丨人人草网站丨精品国产露脸对白在线观看丨成人国产欧美大片一区丨亚洲国产剧情中文视频在线丨亚洲色图欧美视频丨精品久久网丨成人福利网丨久久精品这里丨大奶毛片丨暖暖日本在线观看丨国产美女a做受大片观看丨国产精品色拉拉丨日韩中文字幕在线专区丨九九av在线丨久久午夜精品视频丨肉丝美脚视频一区二区丨草草视频网站丨久久精品视频在线看丨欧美性欧美zzzzzzzzz

1）抗原熱修復(fù) 可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室的具體條件，選用微波爐抗原修復(fù)、高壓鍋抗原修復(fù)或水浴高溫抗原修復(fù)?？乖瓱嵝迯?fù)可選用各種緩沖液，如TBS、PBS、重金屬鹽溶液等，但實(shí)驗(yàn)證明，以0.01M枸櫞酸鹽緩沖液（pH6.0）效果。請(qǐng)選用我公司提供的ZLI-9064 枸櫞酸鹽緩沖液（粉劑）配制，取該粉劑一包溶于1000ml的蒸餾水中，混勻，其pH值在6.0 ± 0.1，如因蒸餾水本身造成的pH值偏差，請(qǐng)自行調(diào)整。
（1）高壓熱修復(fù) 切片脫蠟至水。將1500ml~3000ml的0.01M枸櫞酸鈉緩沖溶液（pH6.0，工作液）或0.001M EDTA（pH8.0）注入不銹鋼壓力鍋中加熱至沸騰。切片置于金屬架上，放入鍋內(nèi)，使切片位于液面以下，蓋鍋壓閥。當(dāng)壓力鍋開始慢慢噴氣時(shí)（約加熱5~6分鐘后），計(jì)時(shí)1~2分鐘，然后將壓力鍋端離熱源，冷水沖至室溫后，取下氣閥，打開鍋蓋，取出切片，蒸餾水洗后，PBS洗2分鐘×3，下接免疫組化染色步驟。
 
（2）煮沸熱修復(fù) 切片脫蠟至水后，放入盛有0.01M枸櫞酸鈉緩沖溶液（pH6.0，工作液）的容器中，并將此容器置于盛有一定數(shù)量自來水的大器皿中，電爐上加熱煮沸，從小容器的溫度到達(dá)92℃~98℃起開始計(jì)時(shí)15~20分鐘，然后端離電爐，室溫冷卻20~30分鐘，蒸餾水沖洗，PBS洗，
 
（3）微波熱修復(fù)。切片脫蠟至水后，3％H2O2處理10分鐘，蒸餾水洗2分鐘×3。將切片放入盛有枸櫞酸鹽緩沖液（工作液）的容器中，置微波爐內(nèi)加熱使容器內(nèi)液體溫度保持在92℃~98℃之間并持續(xù)10~15分鐘（注意：無論是使用醫(yī)用或家用微波爐，請(qǐng)根據(jù)具體機(jī)型酌情設(shè)置條件，務(wù)必滿足以上步驟中對(duì)溫度和時(shí)間的要求）。取出容器，室溫冷卻10~20分鐘（注意：不可將切片從緩沖液中取出冷卻，以便使蛋白能夠恢復(fù)原有的空間構(gòu)型）。PBS洗，下接免疫組化染色步驟。適用的抗原有：AR，Bax，bcl-2，C-fos，X-jun，C-kit，C-myc，E-cadherin，Chromogranin A，Cyclin，ER，Heat shock protein，HPV，Ki-67，MDMZ，p53，p34，p16，p15，P-glycoprotein，PKC，PR，PCNA，ras，Rb，TopoismeraseⅡ等。
 
2）酶消化方法 常用0.1%胰蛋白酶和0.4%胃蛋白酶液。胰蛋白酶使用前預(yù)熱至37℃，切片也預(yù)熱至37℃，消化時(shí)間約為5~30分鐘（胰酶的zui終濃度可以根據(jù)使用者的要求進(jìn)行調(diào)整，濃度范圍可以從0.05%至0.25%）； 胃蛋白酶消化37℃時(shí)間為30分鐘。皂素（Saponin）：一般使用濃度為2~10mg/ml的saponin溶液，消化時(shí)間為室溫孵育30分鐘。 適用于被固定遮避的抗原，其中有：Collagen，Complement，Cytokeratin，C-erB-2，GFAP，LCA，LN等。