国产精品视频500部丨天堂视频中文在线丨狠狠色伊人亚洲综合网站l丨136fldh导航福利视频丨亚洲综合激情丨yes4444视频在线观看丨人人草网站丨精品国产露脸对白在线观看丨成人国产欧美大片一区丨亚洲国产剧情中文视频在线丨亚洲色图欧美视频丨精品久久网丨成人福利网丨久久精品这里丨大奶毛片丨暖暖日本在线观看丨国产美女a做受大片观看丨国产精品色拉拉丨日韩中文字幕在线专区丨九九av在线丨久久午夜精品视频丨肉丝美脚视频一区二区丨草草视频网站丨久久精品视频在线看丨欧美性欧美zzzzzzzzz

1、冰凍切片固定

冰凍切片37℃烘烤10至20分鐘，控干水分，置于4%多聚甲醛固定30min。于PBS緩沖液中晃動洗滌3次，每次5分鐘。

2、抗原修復(fù)

將切片浸沒在升滿EDTA抗原修復(fù)緩沖液（PH8.0）的修復(fù)盆中，置于微波爐內(nèi)進行抗原修復(fù)，修復(fù)條件：中火8min至沸——停火8min保溫——中低火7min（整個過程需防止修復(fù)液過度蒸發(fā)，切勿干片。

自然冷卻后，將切片置于PBS緩沖液中。然后在搖床上，晃動洗滌3次，每次5min。

3、畫圈血清封閉

切片稍甩干后，用組化筆在組織周圍畫圈，滴加組織自發(fā)熒光淬滅劑A液，室溫孵育30min，純水洗5分鐘，接著滴加BSA牛血清白蛋白，封閉30min。

4、加一抗

輕輕甩掉封閉液，在切片上滴加按比例配好的一抗后，切片平放于濕盒內(nèi)4℃孵育過夜，這里推薦使用生科云選一抗實驗效果更佳。

5、加二抗

切片浸沒在PBS緩沖液中，然后在生科云選搖床上，晃動洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后，滴加生科云選熒光二抗，覆蓋組織，避光室溫孵育50min。這里推薦使用生科云選二抗實驗效果更佳。

6、DAPI復(fù)染細胞核

切片浸沒在生科云選PBS緩沖液中，晃動洗滌3次，每次5min。甩干后，在圈內(nèi)滴加生科云選即用型DAPI染液，避光室溫孵育10min。

7、淬光組織自發(fā)熒光

切片置于生科云選PBS緩沖液中，晃動洗滌3次，每次5min。在圈內(nèi)滴加生科云選組織自發(fā)熒光淬滅劑B液，避光室溫孵育5min，水洗10min。

8、封片

切片稍甩干后用生科云選抗熒光淬滅封片劑封片，推薦使用生科云選配套試劑、耗材、儀器，實驗效果更佳！

冰凍切片免疫熒光結(jié)果判讀：

DAPI染出來的細胞核在紫外的激發(fā)下為藍色，陽性表達為相應(yīng)熒光素標記的紅光或綠光等。