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一、配制培養(yǎng)基：50mL的培養(yǎng)基，可以用450mI DMEM （89%）+50ml胎牛血清（10%）+5ml雙抗（1%）配制。

二、配制細(xì)胞凍存液：現(xiàn)配現(xiàn)用，根據(jù)細(xì)胞類型調(diào)整培養(yǎng)基、血清和DMSO的比例，通常為6：3：1或7：2：1。例如，對(duì)于存活率高的細(xì)胞系，可以用培養(yǎng)基：血清：DMSO=7：2：1的比例配制，對(duì)于存活率低的細(xì)胞系或需要長(zhǎng)時(shí)間保存的細(xì)胞系，可以增加血清濃度。

血清使用注意事項(xiàng)

一、避免反復(fù)凍融。血清解凍后，可在2-8℃條件下儲(chǔ)存6周。如解凍后的血清儲(chǔ)存時(shí)間需要大于6周，建議分裝成合適的體積并重新凍存。

二、如血清中含有大量的沉淀，不建議直接過(guò)濾血清。如有過(guò)濾需求，可將血清分裝至無(wú)菌離心管中，稍微離心，取上清液直接加入培養(yǎng)基內(nèi)混合后再過(guò)濾。

三、血清沒(méi)有混勻且放置于高于40℃的水浴中，底部的蛋白會(huì)變性形成沉淀。

四、使用時(shí)注意無(wú)菌操作，防止細(xì)菌污染